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“大器晚成”的多肽合成方法-酶促合成法

发布时间:2021-06-15

肽键的酶促合成,其定义是指利用蛋白水解酶的逆转反应或转肽反应(肽的一部分和其他肽的一部分或氨基酸的交换转移反应。有 肽 键 的胺 基被另一胺基所置换的胺转移反应)来进行的肽键合成。近年来,这个方法有了一些新的发展。它作为对多肽化学合成的-一个辅助和补充,不斤已经成功地用于许多小肽以及像脑啡肽、增血压素等生物活性肽的合成,沥更成功的是用于某些 蛋 白 质 如胰岛素、胰蛋白酶yi制剂、牛胰核糖核酸酶A和葡萄球菌核酸酶、胰舒血管素yi制剂和细胞色素c等的重合成和半合成。酶促合成肽键的反应原理和反应条件

我们知道,象胰蛋白酶、糜蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶等都是蛋白水解酶,它们能在专--的氨基酸位置上水解单白质,并在体内消化单白质的过程中起着重要作用。这些蛋白酶水解蛋白质的过程实际上还包含易系列的可逆过程。因此,在适度的条件下,也可以通过蛋白酶的水解逆反应来合成肽键。

蛋白水解酶同时具有合成肽键的能力,很早就被人们发现。1937年,贝尔格曼( Bergmann)和富兰克尔-康瑞特(Fraenkel-Conrat) 将ZGly (4.2%) 和苯胺(3.7%)在pH4.6,40℃条件下通过木瓜蛋白酶反应,弟易次得到了酶促合成的酰胺Z-GlyNHCH。反应1小时即开始出现产物的结品,数天后可以得到80%的产率。

因为酶促合成多肽因为ji术和理论的困难,以及化学合成方法的迅速发展,多肽化学家们的注意力几乎劝步集中到化学合成上来了。这使得人们怀疑它是否能成为一种肽键合成的有用的方法而发挥作用,因而忽视了对它的研究。

在近几年来,在单白质的化学合成方面,尽管经过很大的努力,但对合成较大分子的单白质来说,仍然存在着很大的困难,这才重新引起了人们对酶促合成方法的注意,从而进一步对酶促合成的反应条件和影响反应产率的个中因素进行了比较深入的研究;昂拓生物的专家团队也在积极地探寻如何优化酶促合成法;并取得了一些新的结果。

酶促合成法的优化思路

①可 容 反应物生成 不 容 产物;②增加反应物浓度;③寻找追适pH和缓冲液;④探讨盐浓度的影响;⑤酶的性质等


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